酶聯(lián)免疫吸附測定法

1971年瑞典學(xué)者Engvall和Perlmann,荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法，即酶聯(lián)免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques ) 的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù) 。

中文名

酶聯(lián)免疫吸附測定法

外文名

Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA

別名

ELISA法

發(fā)現(xiàn)者

Van Weerman

原理

抗體與酶復(fù)合物結(jié)合顯色

酶聯(lián)免疫吸附法(elisa)檢測hbsag因具有靈敏度高、特異性強等優(yōu)點而被廣泛應(yīng)用，但在日常工作中檢測hbsag常遇到假陽性率高、重復(fù)性不好的現(xiàn)象。hbsag假陽性結(jié)果易給廣大體檢人員造成大的精神壓力，易引起體檢人員對檢測人員的投訴，同時對檢驗機構(gòu)易造成不良的聲譽[1]。針對這一現(xiàn)象，為了使檢驗結(jié)果更加準確、假陽性率更低，筆者采用同一種試劑對不同的血清標本進行重復(fù)測定分析，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1．1 血清標本采靜脈血做乙肝兩對半的血清標本均來自來我院進行單位職工年度體格檢查。

1．2 試劑和儀器上?？迫A生物工程有限公司生產(chǎn)的乙肝hbsag酶聯(lián)免疫試劑盒，深圳雷杜酶標儀和洗板機。

1．3 分組和檢測方法嚴格按照說明書進行操作，在操作過程中，小心吸取血清，避免人為造成影響[2]。分3類情況進行觀察。a組：不抗凝血液標本：取96份不抗凝血液標本，每份分為三管，分別靜置0．5、1、2 h后用3 000r／min離心l5 min，取出血清分別檢測hbsag。b組：加抗凝劑標本：采集50份靜脈血標本，每份標本分別用不抗凝管、肝素鈉抗凝管、edta一2ka管、枸櫞酸鈉管這4種管各裝l管，其中不抗凝標本靜置2 h后3 000 r／min離心15 min，另3管靜置2 h析出血漿。c組：含血細胞標本：從體檢人員中抽出45例健康人血液標本(hbsag陰性者)。取45份血清和血細胞每份血清1．2 ml，血細胞0．2ml。把0．2 ml的血細胞加生理鹽水，校正紅細胞計數(shù)為1．0×10  12 l  -1 ，然后按表1進行稀釋制成含有不同血細胞的血清標本，然后對含有不同濃度血細胞的標本進行hbsag的檢測。